本研究本首次建立了基于颜色判定的RT-LAMP方法快速检测人冠状病毒HCoV-NL63基因。该检测方法与传统的荧光定量RT-PCR检测法相比在40 min内直接通过肉眼观察即可达到对病毒鉴定的目的，大大缩短了检测时间，更具时效性。在灵敏性实验中，该RT-LAMP检测方法最低检测下限为160拷贝/反应，与常规检测法最低检测下限相当，具备较好的反应灵敏性。在特异性检验结果中，该检测方法仅能与HCoV-NL63病毒基因组发生特定颜色反应，而与其他同种属人冠状病毒、流感病毒、诺如病毒等均不能发生反应，表明该方法具备较好的检测特异性。此外，对无锡空港口岸2014-2015年收集的312份鼻咽拭子样本通过传统的检测法和本研究建立的方法分别对HCoV-NL63病毒进行筛查，结果表明两种方法检测结果完全一致，表明该RT-LAMP法可替代传统检方法，且具有不依赖于高技术硬件设备、但却有高灵敏性、高特异性、快速、操作简便、成本低廉等优点，特别适用于机场、口岸及硬件条件不佳的卫生检疫工作一线和基层单位对病原体进行快速诊断，具有重要的推广应用价值
    　　本项目建立了基于颜色判定的RT-LAMP技术快速检测人冠状病毒NL63基因的新方法，具有检测灵敏度高、特异性强、操作简便、成本低廉等优点，发表核心学术论文1篇，申请国家发明专利2项，参与申请并获得国家实用新型专利1项，研发快速检测试剂盒产品1个并在无锡、新疆、宁波、吉林等国境口岸传染病检测中推广应用，取得了一定的经济效益和社会效益。

成果完成人：耿合员;汪圣强;于九洋;孙悦;邢琛;易海华;秋雯;曹晓蕴;丁均;邱文毅;朱磊;吴瑜凡;杨志俊

完成单位：无锡出入境检验检疫局

单位电话：0510-88219865;88700088

联系人：窦明池

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合作完成单位：常州出入境检验检疫局;张家港出入境检验检疫局;江阴出入境检验检疫局;盐城出入境检验检疫局