本项目以兽药氨苯砜和病原微生物为研究对象，综合运用生物、材料、光谱、化学等多学科前沿科学技术，对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，系统开发快速免疫检测产品，满足实际检测中对定性及定量快速检测的需求，开发系列化检测产品；利用LAMP技术的原理制成环介导等温扩增技术检测食品病原菌的试纸条，并利用试纸条实现食品病原菌的现场检测,同时研究试纸条冷冻干燥条件及工艺参数，对其检测效果进行评价。为食品中兽药残留和病原微生物检测提供高效、快速、系列化的检测技术。
项目来源: 河北省科技计划项目。项目名称：食品中砜类抑菌剂及病原微生物快速检测技术研究；项目编号：152776120D；立项日期：2015年1月1日；结题日期：2017年12月31日；项目说明：项目完成单位为河北农业大学，项目完成人：刘卫华，苑宁，李慧，王向红, 王羽，郑小娇，张晶，张伟，李红卫。技术领域：食品安全检测；应用领域：食品中氨苯砜及病原菌的快速检测。

    1.技术创新程度。本研究对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，取得技术突破、掌握核心技术，并建立两种氨苯砜快速免疫检测分析方法；同时利用LAMP技术的原理制成环介导等温扩增技术检测食品病原菌的试纸条，并研究比较了几种不同的试验结果的可视化效果，使检验更准确便捷，实现多项技术创新。
2.技术指标的先进程度。在免疫分析方法的研究中，确立快速、灵敏的氨苯砜ELISA检测方法，检测灵敏度达到0.02 μg/L；胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限为20 μg/L。检测时间均≤2hr，符合快速检测的需求。 开发出环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌的试纸条,七种病原菌的检出限为4.8cfu/g(ml)，从样品处理到报告结果，整个过程在20分钟之内完成。

    以兽药氨苯砜为研究对象，对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，完成了氨苯砜人工抗原的合成与抗体的制备，建立了氨苯砜直接竞争ELISA检测方法建立并经过验证；研究出氨苯砜胶体金标记试纸条检测方法。对于样品基质干扰的技术难题，在课题人员不断努力的重复和试验下，终于在机制消除这一问题上得到了解决，实现了较高的加标回收率。 以病原微生物为研究对象，将LAMP技术应用于固相载体，制成LAMP技术检测食品中七种病原菌的试纸条；研究了LAMP反应体系在液相环境中长久贮存的方法；建立了LAMP技术检测变形杆菌的快速可视化方法，利用钙黄绿素作为指示剂，具有良好的特异性，灵敏度达到4.8CFU/mL。

    食品中病原菌传统检测方法繁琐、耗时长，而环介导等温扩增技术（LAMP）可以高效、快速、特异的检出食品中的病原菌，但仍不能满足基层单位和现场检测的需要，因此急需改进LAMP检测技术，研制环介导等温扩增检测食品病原菌的试纸条，使其操作更加简便，耗时更短，能够在现场完成检测，可在基层广泛推广应用。在免疫分析方法的研究中，确立快速、灵敏的氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达μg/kg级，胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限达20 μg/L，检测时间≤2hr，符合快速检测的需求；环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌,检出限为4.8 cfu/g(ml)，从样品处理到报告结果在20分钟之内完成。方法稳定性较高、特异性强，效果较好。氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达到μg/kg级；胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限为20 μg/L，检测时间均≤2hr。环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌，检出限为4.8 cfu/g(ml)，20分钟之内完成，满足现场快速检测的需求。

    本研究对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，取得技术突破、掌握核心技术，并建立两种氨苯砜快速免疫检测分析方法；同时利用LAMP技术的原理制成环介导等温扩增技术检测食品病原菌的试纸条，并研究比较了几种不同的试验结果的可视化效果，使检验更准确便捷，实现多项技术创新。在免疫分析方法的研究中，确立快速、灵敏的氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达μg/kg级，胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限达20 μg/L，检测时间≤2hr，符合快速检测的需求；环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌,检出限为4.8 cfu/g(ml)，从样品处理到报告结果在20分钟之内完成。方法稳定性较高、特异性强，经应用，效果较好。氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达到μg/kg级；胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限为20 μg/L，检测时间均≤2hr。环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌，检出限为4.8 cfu/g(ml)，20分钟之内完成，满足现场检测工作中对快速检测的需求。

    本研究对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，取得技术突破、掌握核心技术，并建立两种氨苯砜快速免疫检测分析方法；同时利用LAMP技术的原理制成环介导等温扩增技术检测食品病原菌的试纸条，并研究比较了几种不同的试验结果的可视化效果，使检验更准确便捷，实现多项技术创新。在免疫分析方法的研究中，确立快速、灵敏的氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达μg/kg级，胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限达20 μg/L，检测时间≤2hr，符合快速检测的需求；环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌,检出限为4.8 cfu/g(ml)，从样品处理到报告结果在20分钟之内完成。方法稳定性较高、特异性强，经应用，效果较好。氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达到μg/kg级；胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限为20 μg/L，检测时间均≤2hr。环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌，检出限为4.8 cfu/g(ml)，20分钟之内完成，满足现场检测工作中对快速检测的需求。

    04、仿真级：在实验室关键功能仿真验证结论成立

    本项目以兽药氨苯砜和病原微生物为研究对象，综合运用生物、材料、光谱、化学等多学科前沿科学技术，对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，系统开发快速免疫检测产品，满足实际检测中对定性及定量快速检测的需求，开发系列化检测产品；利用LAMP技术的原理制成环介导等温扩增技术检测食品病原菌的试纸条，并利用试纸条实现食品病原菌的现场检测,同时研究试纸条冷冻干燥条件及工艺参数，对其检测效果进行评价。为食品中兽药残留和病原微生物检测提供高效、快速、系列化的检测技术。
氨苯砜的ELISA检测方法，检测灵敏度达到μg/kg级；胶体金标记试纸条检测方法的最低检出限为20 μg/L，检测时间均≤2hr。环介导等温扩增试纸条法检测食品中七种病原菌，检出限为4.8 cfu/g(ml)，20分钟之内完成，满足现场检测工作中对快速检测的需求。

    以兽药氨苯砜和病原微生物为研究对象，综合运用生物、材料、光谱、化学等多学科前沿科学技术，对抗体制备技术、免疫标记技术、固相膜免疫检测技术、基质屏蔽技术等一系列关键技术进行攻关研究，系统开发快速免疫检测产品，满足实际检测中对定性及定量快速检测的需求，开发系列化检测产品；利用LAMP技术的原理制成环介导等温扩增技术检测食品病原菌的试纸条，并利用试纸条实现食品病原菌的现场检测,同时研究试纸条冷冻干燥条件及工艺参数，对其检测效果进行评价。为食品中兽药残留和病原微生物检测提供高效、快速、系列化的检测技术。
本技术需要培育新的市场。产品定价：成本+利润。成本包括研发费用、原材料、人力成本、推广宣传成本等。销售渠道：计划采用“传统市场渠道+电子商务渠道“的形式。在传统市场渠道方面，针对单位用户和个人用户，采用不同的推销方式；建立体验门店。大力发展电子商务销售模式。产品推广模式：客户试用，客户评分，反馈信息，客户体验分享。组织各种展销会和市场推广活动，使快速检测产品深入人心，人人知晓，家家可用，人人会用。目前没有典型的试用客户。