化学化工
叶酸缺乏对胃癌细胞多态性的机理研究
成果概况
成果类别: | 应用技术 | 体现形式: | 新技术 | 课题来源: | 地方计划 |
起止时间: | 2012.01 至2014.12 | 研究形式: | 独立研究 | 所处阶段: | 初期阶段 |
成果属性: | 国内技术二次开发 |
成果简介
1.项目来源及背景:
来源:上海卫生和计划生育委员会
背景:PLK 1 沉默对胃癌的影响已有很多证据和研究,而胃癌的发生多在老年人,此类病人的叶酸水平偏低,PLK 1 沉默在叶酸缺乏的情况下,其效率和作用如何?尚未有文献报道。我们在实验中发现:胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823 、 N87和胃粘膜细胞株HFI-145在转染PLK 1 特异 siRNA后,PLK 1 mRNA 和蛋白表达均减少。对于胃癌细胞株,PLK 1 siRNA导致其细胞增生抑制、G2M期阻滞和凋亡增加,叶酸缺乏可以增加此作用,对于胃粘膜细胞株HFI-145,则没有发现此效应。叶酸受体 α (FR-α) 在当成肿瘤标志物和肿瘤治疗靶点上是大有可为的,是一个潜在的肿瘤标志物。亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenete-trahydrofolate reductase,MTHFR)是叶酸提供一碳单位时所需要的关键酶.近年来,关于MTHFR多态性与肿瘤关系的研究较多,目前已发现其与结、直肠癌和急性淋巴细胞白血病等多种的发生有密切的联系.基因芯片在肿瘤新基因的筛选、基因组学的研究、肿瘤亚型分类、肿瘤基因诊断、药物筛选等几个方面有重要作用
2.研究目的及意义:
本课题研究的总目标是确定PLK 1 siRNA、叶酸缺乏及其联合后对胃癌细胞的FR-α表达、MTHFR多态性和肿瘤基因的影响,以及在叶酸缺乏环境得以纠正后,上述影响可否消失。若能证明PLK 1 siRNA和叶酸缺乏是有效的治疗手段,对胃癌病人将是一大福音,肿瘤基因的变化的测定,对胃癌治疗策略的指定和药物的选择均有重大意义。
3.技术原理及性能指标:
(1)完成PLK 1 siRNA对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、 N87和胃粘膜细胞株GES-1的 FR-α表达的影响。
主要技术性能指标:PLK 1 siRNA干扰后,各组细胞的FR-α表达有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,** p<0.01,*** p<0.001。
(2)观察了叶酸缺乏时,对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、N87和胃粘膜细胞株GES-1的 FR-α表达的影响。
主要技术性能指标:将细胞处于叶酸缺乏的培养基中培养一周后,各胃癌细胞的FR-α表达有不同程度的显著的表达作用,与对照组相比较,* p<0.05,** p<0.01。
(3)PLK 1 siRNA和叶酸缺乏联合对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、 N87和胃粘膜细胞株GES-1的 FR-α表达的影响。
主要技术性能指标:PLK 1 siRNA干扰后和叶酸缺乏联合,胃癌细胞SGC-7901、N87、GES-1的FR-α表达有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,* p<0.05,** p<0.01,*** p<0.001。而BGC-823与对照组相比,未显出差异。
(4) 研究观察了叶酸缺乏环境恢复正常后,PLK 1 siRNA和叶酸缺乏联合组细胞的FR-α表达变化。
主要技术性能指标:PLK 1 siRNA干扰和叶酸缺乏环境恢复正常后,各胃癌细胞的FR-α表达有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,** p<0.01,*** p<0.001。
(5)胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823 、 N87和胃粘膜细胞株GES-1、MKN45 MTHFR多态性的差别(MTHFR alpha的 677(C→T)和1298(A→C)两个位点的多态性)。
主要技术性能指标:在MTHFR基因的667位点除NCI-N87没有突变,GES-1、BGC-823、7901、MKN45均由C突变成T。而在1298位点,这几株细胞均为有基因的突变。
(6) PLK 1 siRNA对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、N87和胃粘膜细胞株GES-1肿瘤基因BCL-2和P53表达的影响。
主要技术性能指标:PLK 1 siRNA干扰后,各胃癌细胞的BCL-2表达有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,** p<0.01,*** p<0.001。P53表达均明显增加,* p<0.05,** p<0.01。
(7) 研究了叶酸缺乏对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、N87和胃粘膜细胞株GES-1的MTHFR肿瘤基因BCL-2和P53表达的影响。
主要技术性能指标:将细胞处于叶酸缺乏的培养基中培养一周后,各胃癌细胞的BCL-2表达有不同程度增加作用,但与对照组相比较,未显出统计学差异。P53表达与对照组相比较,未显出统计学差异。
(8) PLK 1 siRNA和叶酸缺乏联合对胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、 N87和胃粘膜细胞株GES-1肿瘤基因BCL-2和P53表达的影响。
主要技术性能指标:PLK 1 siRNA干扰后和叶酸缺乏联合,胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、N87、GES-1的BCL-2表达有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,* p<0.05,** p<0.01,*** p<0.001。GES-1、BGC-823的P53表达与对照组相比较,** p<0.01
(9)研究了叶酸缺乏环境恢复正常3天后,PLK 1 siRNA和叶酸缺乏联合组细胞的肿瘤基因BCL-2和P53表达的变化。
主要技术性能指标:PLK 1 siRNA干扰后和叶酸缺乏环境恢复正常3天后,胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、N87、GES-1的BCL-2表达有不同程度的抑制作用,与对照组相比较,* p<0.05,** p<0.01。
4.社会经济效益:
本研究,初步能证明PLK 1 siRNA和叶酸缺乏是有效的治疗手段,对胃癌病人将是一大福音,肿瘤基因的变化的测定,对胃癌治疗策略的指定和药物的选择均有重大意义。.
应用前景
主要应用行业: | 卫生和社会工作 | 知识产权形式: | 其他 |
应用状态: | 产业化应用 | 拟转化方式: |
单位概况
完成单位: | 上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院 | ||||
单位地址: | 上海市崇明县南门路25号 | ||||
单位电话: | 021-69692701;69691269 |
联系方式
联系人: | 李冬 | 联系人电话: | 021-69696497 | 联系人Email: | kjk6308@126.com |