化学化工
S-腺苷蛋氨酸的酶法生产及其专用固定化酶
成果概况
成果类别: | 应用技术 | 体现形式: | 新技术 | 课题来源: | 地方计划 |
起止时间: | 2011.01 至2012.12 | 研究形式: | 与院校合作 | 所处阶段: | 成熟应用阶段 |
成果属性: | 原始性创新 |
成果简介
本项目属于生物化工领域,涉及酶固定化以及利用固定化酶催化合成高附加值化合物S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)。SAM是广泛存在于生物体内的一种重要代谢中间体,在体内由L-蛋氨酸(L-Met)和三磷酸腺苷(ATP)经SAM合成酶(S-adenosylmethionine synthetase)催化合成,SAM已经被广泛应用于医药和保健品领域。目前SAM的工业化生产方法是酵母菌发酵法,而体外酶促转化法是目前研究的热点。与发酵法相比酶法合成SAM具有生产周期短、底物转化率高、纯化工艺简单、能耗低以及环境友好等优点,更易于进行工业化生产以及降低SAM产品价格,从而使消费者从SAM生产技术进步中受益。因此,体外酶催化合成SAM具有广阔的推广应用前景。
体外酶催化制备SAM的关键是获得大量低成本的SAM合成酶,同时通过固定化技术提高SAM合成酶的稳定性以及重复使用批次。基于以上分析,本项目构建了能高效组成型表达SAM合成酶的基因工程菌,单位体积发酵液重组SAM合成酶活力比野生菌摇瓶培养提高了320倍,单位质量菌体重组酶活力比野生菌提高了约60倍。通过包埋法对重组细胞进行固定化,然后使用固定化整细胞以三磷酸腺苷(ATP)和L-蛋氨酸为底物催化合成SAM,35 ℃反应8 h SAM合成量达到10-12 g/L,底物转化率达到95%以上。
同时也对重组SAM合成酶进行了一步纯化,使用多种载体对SAM合成酶进行了固定化研究,最终选取氨基树脂用于制备固定化SAM合成酶,固定化酶活力回收率达到76%,半衰期为15-20批次,具有优良的操作稳定性。将固定化酶用于SAM的催化合成,35 ℃反应8 h 反应液中SAM的累积量达到10.8 g/L,底物转化率达到95%,通过阳离子交换层析对SAM进行纯化,最终SAM的总收率达到70%。
本项目申请国家发明专利3项,已授权2项,发表相关论文十余篇,对酶法生产S-腺苷蛋氨酸的推广应用具有重要的意义。该专利技术已经于2012年10月转让给企业并实施生产。2013年共生产和销售S-腺苷蛋氨酸1500公斤,新增利润112.5万元,新增税收16.9万元。2014年新增销售额570万元,新增利润142.5万元,新增税收21.4万元。
应用前景
主要应用行业: | 制造业 | 知识产权形式: | 专利 |
应用状态: | 产业化应用 | 拟转化方式: |
单位概况
完成单位: | 西北工业大学 | ||
单位地址: | 陕西省西安市碑林区友谊西路127号 | ||
单位电话: | 029-88492273;88494857 |
联系方式
联系人: | 常威威 | 联系人电话: | 029-88460723 | 联系人Email: |