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高效基因克隆技术

2003年

应用技术

成果简介

该成果构建的克隆载体经特定的限制性内切酶酶切后，产生的粘性末端能与Sau3AI(或Sau3AI的同尾酶)部分酶切的基因组片段补加一个碱基dGTP后的粘性末端匹配，可有效地构建基因组文库，也能克隆PCR产物。该技术选用的限制性内切酶可以是EarI和SapI中的任一种。使用该载体克隆PCR产物时需在PCR引物的5’端额外引进Sau3AI酶切位点，在dGTP存在的条件下，利用T4DNA聚合酶的3’～5’...

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