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无饲养细胞（feeder cells）法单克隆细胞纯化扩增—转基因后多克隆细胞的有限稀释法分离培养单克隆细胞技术的改良探索

2016年

基础理论

成果简介

本研究使用悬浮生长的T淋巴细胞系做为转基因靶细胞，利用电穿孔稳定转染法的高电压将外源人工合成的质粒导入细胞中，经过约一周的含抗生素分离培养基的筛选培养，初步得到整合有携带抗性基因标记质粒的多克隆细胞，瞬时转染的不稳定细胞多数筛除。利用有限稀释法将细胞计数并稀释，约96孔培养板中每孔含200微升培养基并含有一个靶细胞。一组培养基无细胞成分，来自一天前换液传代的同种T淋巴细胞的培养上清，当时其...

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