山区饲草饲料资源丰富，羊能充分利用本地荒山草坡和农作物秸秆资源，将青粗饲料转换为畜产品，而且能够减少农作物秸秆焚烧引起的空气污染。二是，山区远离城市和村庄，可以形成一个天然的防疫屏障，减少口蹄疫、小反刍兽疫等传染病的感染机会；另外，山区的土地承包费用比较低，可以利用这些土地生产优质粗饲料，饲养成本比较低。但由于繁殖管理跟不上去，包括没有进行有效的早期妊娠诊断，没有将妊娠母羊、未妊娠母羊以及公羊分圈饲养，没有将妊娠母区别对待，使得妊娠母羊早期流产，产羔间隔延长，从而降低了肉羊养殖的经济效益。本项目针对山区肉羊养殖过程中存在的配种受胎率低和产羔率低等问题，以邯郸西部山区的小尾寒羊为试验材料，就肉羊高效繁殖的关键技术（主要包括山区肉羊人工授精技术和早期妊娠对绵羊淋巴结和脾脏免疫调节），进行示范与推广，以此带动我省山区肉羊的可持续发展，提高饲养肉羊的经济效益。

    本项目通过分子检测发现：（1）早期妊娠引起分子量为80 kDa的孕激素受体在绵羊脾脏高表达。（2）在妊娠16天绵羊脾脏，分子量为22kDa和25kDa的PIBF两种亚型显著高于其它组。（3）早期妊娠引起绵羊脾脏和淋巴结表达IL-10增加。上述发现为绵羊早期妊娠免疫抑制形成的机理提供了理论支持，同时也为提高肉羊繁殖率提供理论支持。 杜泊绵羊原产于南非，因其适应性强、早期生长发育快、胴体质量好而闻名。杜泊绵羊是改良和提高当地绵羊肉用生产性能的优良终端父系，特别是利用杜泊绵羊作父本，小尾寒羊作母本进行商品肉羊生产，充分利用杜泊绵羊的肉用性能和小尾寒羊的多羔性，提高养羊业的效益。绵羊人工授精可以明显提高种公羊的利用率。但是，精液稀释液的不同会直接影响受胎率。本项目发现：采用Tris+糖的稀释液稀释公羊精液比传统的柠檬酸钠或柠檬酸钠+糖，可以提高不返情率15.38%，提高受胎率10.77%。在短时间室温保存后，精子的活率还可以满足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技术的推广。

    本项目研究发现，在早期妊娠绵羊脾脏，TNF-β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6和IL-10上调表达，但是，IFN-γ在妊娠后第13和16天表达量下降。本项目研究还发现，在妊娠第13或16天绵羊淋巴结中Th1和Th2细胞因子的表达最高。此外，和未妊娠母羊相比，妊娠第25天绵羊淋巴结中TNF-β和IL-2表达下降，IL-5和IL-10表达量增加。妊娠第25天绵羊淋巴结和未妊娠母羊相比，IFN-γ、IL-4和IL-6的表达无显著性差异。因此，我们推测早期妊娠可以调节淋巴结Th1和Th2细胞因子的产生，这对于绵羊正常妊娠是必不可少的。
经教育部燕山大学科技查新工作站科技查新，三个查新点：（1）早期妊娠引起分子量为80 kDa的孕激素受体在绵羊脾脏高表达。（2）在妊娠16天绵羊脾脏，分子量为22kDa和25kDa的PIBF两种亚型显著高于其它组。（3）早期妊娠引起绵羊脾脏和淋巴结表达IL-10增加。结论为：“目前国内、外文献未见与本课题完全相同或相似的文献报道”。以上说明本成果具有很高的技术创新性和独占性。

    本项目分析了早期妊娠对绵羊脾脏和淋巴结表达 Th1（IL-2、IFN-γ、TNF-β）和 Th2（IL-4、IL-5、IL-6和IL-10）细胞因子的影响，以便了解早期妊娠对绵羊母体脾脏和淋巴结免疫调节的作用机制。同时，研究发现，利用Tris+糖的公羊精液稀释液，可以将公羊精液在室温条件下短时间保存，精子的活率还可以满足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技术的推广。通过制定了肉羊繁殖标准化技术规范，有利于规范肉羊繁殖人员的技术操作，进一步提高肉羊繁殖率，杜绝人为因素的影响，更好地服务于肉羊生产。在鑫红种羊养殖有限公司和磁县均富养殖场两个厂子推广应用，证实本项目成果可以提高肉羊人工授精妊娠率9%，增加产羔率10%。计划首先在3个以上肉羊养殖场推广应用该技术。

    本项目有强的技术共性，可跨行业推广和扩散，具有可持续发展性，本成果不仅可以应用于山区的肉羊养殖场，而且还可以广泛应用于平原和牧区的肉羊养殖场，应用范围广泛。本项目发现妊娠第16天至第25天母羊脾脏PGR和PIBF mRNA表达降低，妊娠第25天绵羊脾脏PGR80和PGR43表达明显增加，但妊娠第25天时26 kDa亚型PGR和22 kDa的PIBF变异体几乎不表达。免疫组化结果表明PGR和PIBF蛋白定位在脾脏的荚膜、小梁和脾索。此外，研究还发现，在早期妊娠绵羊脾脏，TNF-β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6和IL-10上调表达，但是，IFN-γ在妊娠后第13和16天表达量下降。另外，IFN-γ和IL-6主要在脾脏荚膜、小梁和脾索中表达。同时，研究表明，Tris+糖的精液稀释液，可以将精液在室温条件下短时间保存，精子的活率还可以满足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技术的推广。

    肉羊妊娠早期淋巴结和脾脏Th1和Th1相关基因的表达，直接与早期胚胎丢失相关，本项目突破了传统的观点，发现在妊娠早期，绵羊脾脏的孕激素受体和孕酮诱导阻断因子，以及脾脏和淋巴结的Th1和Th2细胞因子的表达发生改变。这为绵羊早期妊娠免疫抑制形成的机理提供了理论支持，同时也为提高肉羊繁殖率提供理论支持。本项目的研究成果不仅可以应用于肉羊方面的相关研究和技术推广，也可以推广应用到其它动物和人类的相关研究。另外，采用Tris+糖的稀释液稀释公羊精液，在短时间室温保存后，精子的活率还可以满足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技术的推广。此外，本项目制定了肉羊繁殖标准化技术规范，规范了肉羊繁殖人员的技术操作，可以进一步提高肉羊繁殖率，杜绝人为因素的影响，提高肉羊饲养的经济效益。

    07、环境级：例行试验抽样、整架连通、试验结束

    目前，山区肉羊养殖效益低的原因主要在：妊娠早期胚胎丢失比例大，而且配种受胎率低和产羔率低，良种率低。本项目研究表明，利用Tris+糖的公羊精液稀释液，可以将公羊精液在室温条件下短时间保存，精子的活率还可以满足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技术的推广。通过采用本成果，可以增加良种肉羊的覆盖率，提高肉羊的繁殖率，提高饲养肉羊的经济效益，降低肉羊对饲草饲料的消耗，对环境保护也起到一定的作用。不仅可以应用于山区的肉羊养殖场，而且还可以广泛应用于平原和牧区的肉羊养殖场，应用范围广泛。如果采用本项目的绵羊精液稀释液的理想配方，再加上推广本项目制定的肉羊繁殖技术市级标准，可以提高受胎率10.77%。总之，该成果可应用的市场规模巨大，这需要引起相关肉羊养殖公司的足够重视，同时还需要投入一定的人力和物力，使本成果在生产中发挥作用，提高肉羊养殖的经济效益。

    目前，该成果已经在在太行山区和周边地区进行了应用，但是推广该成果需要一定的前期工作，如配种人员的技能培训、熟练度培训、责任心的培养。此外，还要肉羊养殖场的配合，包括饲料要营养均衡，母羊的体况控制，发情母羊的及时配种等等。只有这样，才能达到理想的受配率和妊娠率。为了解决人力财力投入问题，可以和肉羊配种服务公司合作，让肉羊配种服务公司在进行配种服务时就应用该成果，使本成果在生产中发挥作用，提高肉羊养殖的经济效益。也可以和地方业务主管部门合作，将农产品的良种补贴，直接补资金，改为技术和相关产品的补贴，这样可以促进该成果的转化。另外，还可以和河北工程大学生命学院或邯郸市农业专科学校高校合作，高校教师带领学生真正下到基层，实现产学研的结合。

    本项目的研究成果不仅有利于解释肉羊妊娠免疫抑制机制形成和抗黄体溶解机制形成的原理，对肉羊妊娠免疫抑制和抗黄体溶解机制研究具有一定的推动作用，同时对人类相关方面的研究也具有借鉴作用。目前该成果虽然还不能完全用于商业应用，但是本成果研发Tris+糖的精液稀释液，自2016年10月至2018年6月期间，采用试验推广相结合的方法，在太行山区和周边地区应用面积达到肉羊1万余只；提高肉羊人工授精妊娠率8%，提高受胎率10.77%，增加产羔率10%。计划首先在3个以上肉羊养殖场推广应用该技术。此外，本项目还制定了肉羊繁殖标准化技术规范，有利于规范肉羊繁殖人员的技术操作，进一步提高肉羊繁殖率，杜绝人为因素的影响，更好地服务于肉羊生产。但目前由于资金不足，该成果推广应用受到影响。建议加强与企业合作，实现成果的进一步推广应用。