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Ni^(2+)亲和胶的制备及其对带His_6标签融合蛋白的纯化

2003年

应用技术

成果简介

目的：制备Ni^(2+)亲和胶，并检测其纯化带His_6标签融合蛋白的效果。
方法：在强碱条件下，用环氧氯丙烷活化Sepharose4B后，接上多个IDA臂，将Ni^(2+)连接在IDA臂上，即为亲和胶成品。用亲和胶分别在变性和非变性的条件下，纯化包涵体和可溶性表达的带His_6标签的人TRF1和人tankyrase的PARP结构域，并通过Western印迹鉴定纯化的靶...

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