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PCR高通量构建siRNA全位点分子库制备方法

2007年 应用技术
  • 成果简介
本发明公开了一种PCR高通量构建siRNA全位点分子库制备方法,包括环状磷酸接头-1连接、单引物PCR扩增、Ⅲ型限制性内切酶消化、粘性补平、与环状磷酸接头-2连接、双引物PCR扩增、FokI消化、克隆到表达载体等步骤。本发明解决了以限制性内切酶介导的PCR高通量构建siRNA全位点分子库制备方法,由此产生的siRNA功能片断可控性的分布在19-23bp,这样可完全模仿体内自然的siRNA分...
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